透射電鏡技術(shù)服務(wù)
實(shí)驗(yàn)原理
透射電子顯微鏡(transmission electron microscope,TEM)是利用陰極發(fā)射的電子,通過陽極中央的微孔形成的電子束穿透樣品獲得樣品的電子信號(hào),經(jīng)物鏡、中間鏡和投影鏡等多級(jí)電子放大至數(shù)百至數(shù)千萬倍,最后成像在熒光屏上便可即時(shí)觀察,或是投射到照相底片感光片上作為永久記錄。目前TEM的分辨力可達(dá)0.2 nm。
由于標(biāo)本必須置于高真空中進(jìn)行電鏡觀察,所以電鏡觀察的生物標(biāo)本必須特殊制備,不能含水,離體的生物標(biāo)本要迅速加以固定,以防產(chǎn)生結(jié)構(gòu)改變。另外,電子的穿透力很弱,這就需要把樣品制成50 nm~100 nm厚的超薄切片(一個(gè)細(xì)胞切成100~200片)。為了使柔軟的生物組織能夠制成這樣薄的切片,并使切片耐受高真空和電子轟擊,所以在切片前要進(jìn)行包埋。超薄切片技術(shù)是透射電鏡觀察成功的關(guān)鍵。
實(shí)驗(yàn)應(yīng)用
透射電鏡主要應(yīng)用于生物和材料兩大領(lǐng)域的觀察研究。
操作步驟
注意事項(xiàng)
① 組織樣本取材:操作用具4℃預(yù)冷,固定液新鮮,刀片鋒利,取材快速,標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)大小為1mm3;
② 細(xì)胞樣本取材:收集細(xì)胞,去掉細(xì)胞碎片,離心使細(xì)胞壓縮成團(tuán),大小以一個(gè)芝麻粒大小為宜;
③ 請(qǐng)明確拍照部位及拍照倍數(shù)(一般為1000X,2000X,3000X,4000X????到10000X)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
技術(shù)服務(wù)與咨詢:027-87735083